(資料圖)

分子診斷是指應(yīng)用分子生物學(xué)方法檢測患者體內(nèi)遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化而做出診斷的技術(shù)。分子診斷是預(yù)測診斷的主要方法，既可以進(jìn)行個(gè)體遺傳病的診斷，也可以進(jìn)行產(chǎn)前診斷。精準(zhǔn)分子診斷是預(yù)防和控制重大傳染病的關(guān)鍵。

目前基于PCR擴(kuò)增原理的分子檢測技術(shù)已在傳染病診斷中得到廣泛應(yīng)用，然而，該項(xiàng)技術(shù)需精密儀器和專業(yè)操作人員，很難在現(xiàn)場快速檢測中得到應(yīng)用。與傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比，恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在POCT檢測領(lǐng)域展現(xiàn)出明顯優(yōu)勢，但是反應(yīng)原理復(fù)雜、靶基因兼容性低和小型化設(shè)備缺乏成為POCT分子檢測領(lǐng)域的國際難題。

近日，廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物衛(wèi)生研究所聯(lián)合華南農(nóng)業(yè)大學(xué)等單位在傳染病新型分子現(xiàn)場快速檢測領(lǐng)域取得重要進(jìn)展。他們提出了基于線性鏈置換的恒溫?cái)U(kuò)增原理和掌式設(shè)備的一站式解決方案，通過深入研究恒溫?cái)U(kuò)增的原理，發(fā)現(xiàn)線性引物組合可有效啟動恒溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，證實(shí)了線性鏈置換恒溫?cái)U(kuò)增檢測方法的反應(yīng)原理，優(yōu)化得到了該方法的反應(yīng)體系。通過分析LDIA方法對不同GC含量DNA的檢測能力，測試了該方法對不同靶基因的兼容性。

該研究進(jìn)一步探索出以鏈置換探針為基礎(chǔ)的探針法線性鏈置換恒溫?cái)U(kuò)增檢測技術(shù)，增強(qiáng)了反應(yīng)特異性，最低敏感性可達(dá)100拷貝。同時(shí)，該研究開發(fā)了一體化智能檢測設(shè)備與檢測軟件，集成恒溫加熱、熒光監(jiān)測為一體，實(shí)現(xiàn)了LDIA-SD技術(shù)的一站式應(yīng)用，檢測結(jié)果可利用智能手機(jī)進(jìn)行自動分析與云端傳輸，對于傳染病監(jiān)測預(yù)警具有重要意義。

同時(shí)，該項(xiàng)研究還突破了傳統(tǒng)的“恒溫?cái)U(kuò)增需特殊引物結(jié)構(gòu)”認(rèn)知，創(chuàng)建的LDIA-SD技術(shù)反應(yīng)原理簡單、引物設(shè)計(jì)便捷、用戶使用環(huán)境友好，整個(gè)反應(yīng)過程可在1小時(shí)完成，可現(xiàn)場或居家操作，在傳染病現(xiàn)場分子快速檢測領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

相關(guān)研究發(fā)表于Sensors and Actuators B: Chemical。

(資料來源：中國科學(xué)報(bào))

關(guān)鍵詞： 反應(yīng)原理 分子診斷 中國科學(xué)報(bào)